Фото молекула 020: Escentric Molecules Molecule 02 — купить в Москве мужские и женские духи, парфюмерная и туалетная вода Молекула 2 по лучшей цене в интернет-магазине Randewoo

13.06.202325.03.2023 alexxlab Разное

Как отличить подделку escentric molecules от оригинальных духов

Escentric Molecules: в чем причина популярности бренда и количества подделок?

Парфюмерию от немецкого химика и «носа» Геза Шоена можно обожать или не любить, главное, что равнодушных людей к молекулам и эксцентрикам не найти. «Эксцентрик 01» и другие ароматы Escentric Molecules покупают Мадонна и Элтон Джон, чтобы отличить себя не только на фото. На туалетные воды есть мода в интернет-магазинах и сообществах любителей парфюмерии. Чем выше объем продаж у компании, тем больше шансов привлечь внимание нечестных бизнесменов. Они ориентируются на фото и реальные параметры упаковок и флаконов, чтобы сделать контрафакт. Чтобы не стать жертвой мошенников, внимательно изучите основные принципы, как отличить подделку Escentric 01 и Molecule.

Как отличить подделку «Эксцентрик 01» по упаковке: три важных правила

1. Дизайн коробки и флакона для Escentric Molecules всегда делает одна и та же фирма, MeCompany. Черная с нанесенным рисунком, стилизованным под штрих-код, и фиолеовыми полосками упаковка из плотного картона — оригинал. Подделки «Эксцентрик» можно отличить даже на фото.

(настоящая упаковка справа)

2. Внутри самой коробки есть холдер из картона, который защищает молекулы и эксцентрики от повреждений при транспортировке. Если картонной защиты нет, или она не держит духи на месте, то это фейк.

3. Производитель Escentric 01 указывает на коробочке информацию о стране выпуска, объеме (в миллилитрах и жидких унциях), составе парфюма. Название композиции написано без ошибок (Eccentric или esentrik недопустимые варианты!).

(настоящая упаковка справа)

Как отличить подделку Escentric 01 по флакону?

На очереди замечания, как понять, оригинал или нет, по стеклянной емкости. Чтобы сделать примеры нагляднее, мы добавили фото. 

Молекулы и эксцентрики известны лаконичным дизайном пузырька, который творчески повторяет рисунок на коробочке аромата. У оригинала рисунок гармоничный, слегка глянцевый, устойчивый к воздействию (его не получится стереть ногтем), непрозрачный

Толстое неравномерное стекло, вогнутое дно — признаки, как отличить подделку Escentric Molecules.Дозатор выполнен качественно, он невысокий, с матовым ободком. Распыляются молекулы и эксцентрики в случае оригинала легко, равномерно.

Признаки, которые не могут указывать на подделку аромата 

Отсутствие крышки. Для подлинного парфюма это нормально, а не признак контрафакта. Молекулы не выветриваются, поэтому крышечек у них нет. 

Наличие или отсутствие треугольника на донышке флакона. Когда бренд Escentric Molecules только начинал работу, треугольник действительно был знаком качества. Сейчас его нет, но это не является признаком подделанного или оригинального аромата. (иногда треугольник встречается). 

Цвет продукции. У оригинала он может колебаться от прозрачного до насыщенно-желтого. 

Стойкость аромата. Категория субъективная, особенно в случае в молекулами. Ориентироваться на шлейф и думать, как отличить подделку Escentric 01 от оригинала, не получится.

Molecule 01: почему духи от Гезы Шоена так часто подделывают?

Первые парфюмы компании Escentric Molecules вышли в 2006. Они перевернули рынок привычных нишевых ароматов. В противовес натуральности немецкий парфюмер подчеркивал синтетическую природу молекул и эксцентриков. Поклонники нового бренда охотно покупали духи в интернет-магазинах, но и мошенники обратили внимание на Escentric Molecules, чтобы создавать контрафакт. Понять, как отличить подделку Molecules 01, не так сложно. Мы расскажем все по порядку и проиллюстрируем примеры фото оригиналов и фейков.

Как отличить подделку Molecule 01: полезный чек-лист

С помощью простого теста можно быстро определить, оригинал это или подделка. Если ответ на следующие пункты «да», то у вас в руках фейковая туалетная вода.

(справа истинный продукт, слева фейк: подделка отличается тем, что рисунок просвечивается) 

Упаковка на вид даже по фото дешевая, с аляповатым ярким рисунком

(оригинал справа) 

Название духов «Молекула 01» написано с ошибкой (Malecule, molekula 1), нужно сравнить с упаковкой оригинала 

Внутри коробки подделки Molecules 01 отсутствует картонный холдер, или он сделан неровно и не удерживает туалетную воду на месте 

Полезный способ, как отличить фейк: посмотреть на флакон на просвет. Если есть заметный шов на стекле или неровности, то об оригинале речь не идет

(слева подлинник) 

Банальная проверка батч-кода часто отвечает на вопрос, как отличить подделку молекул и эксцентриков. У контрафакта номер отсутствует на донышке коробки, переклеен или затерт, а также не пробивается на специальных сайтах 

Рисунок на флакончике выполнен тускло, его можно соскрести ногтем 

Трубочка пульверизатора толстая, заметная, не доходит до дна или, наоборот, загибается вбок 

Как отличить подделку Molecule 01 по фото? Донышко флакона вогнутое (у оригинала Молекулы без изгибов)

(настоящая вода справа) 

Горлышко пузырька неровное, пульверизатор работает с перебоями

(оригинальная версия слева)

По каким пунктам нельзя определить фейковые Molecule 01?

Как отличить подделку молекул и эксцентриков, мы рассказали используя фото. Но есть пункты, по которым сравнивать духи нельзя: 

1. Стойкость, звучание парфюма — нередко именно по тому, насколько «шлейфит» покупка, делают вывод о ее принадлежности к одному из лагерей. Это ошибка! Молекулы и эксцентрики раскрываются индивидуально, в зависимости от сезона, одежды, температуры тела, особенностей обоняния и многих других факторов.

2. Цвет туалетной воды — один и тот же оттенок мы воспринимаем по-разному на фото и в жизни. Причиной этому освещение, угол съемки, зрение и не только. Плюс цветовое наполнение флакона может незначительно меняться, для бренда Escentric Molecules — это вполне нормально. 

3. Отсутствие крышки — это особенность дизайна, потому что подлинники молекул и эксцентриков не выветриваются. По этому можно отличить их от безликого множества парфюмов.

Как отличить подделку Escentric 02: основные правила

Любая композиция от Escentric Molecules становится хитом, и «Эксцентрик 02» не исключение. Есть и обратная сторона успеха: популярные парфюмы копируют мошенники, выдавая подделку за оригинал. Что нужно помнить покупателям, чтобы распознать даже качественный фейк? Подделки Escentric 02 часто делятся на две категории: грубые и качественные. Халтуру отличить несложно: она лишь условно копирует оригинал. Какие общие отличия есть у низкокачественных подделок «Эксцентрик 02»? 

1. неправильное написание названия (вместо Escentric 02 может стоять Esentric или eccentrik 2) 

2. флакон выполнен из мутного стекла, с бросающимися в глаза неровными швами

(фейк)

3. отсутствует даже имитация батч-кода или наклеек внизу коробки и бутылочки 

4. упаковка эксцентрика или молекулы сделана из мягкого неровного картона или отсутствует

Дорогие фейки Escentric Molecules: как отличить от оригинала?

С некачественными парфюмами разобраться легче. Как отличить подделку, если она очень похожа на оригинал? Расскажем с примерами на фото 

1. Цена. Сравните стоимость духов с тем, сколько они стоят в официальных интернет-магазинах. Регулярных скидок в 70% на нишевую парфюмерию не бывает! Если цена на «Эксцентрик 02» подозрительно низкая, лучше воздержаться от покупки. 

2. Качество упаковки. Осмотрите коробку и внутренний холдер туалетной воды. Картон без равномерного глянца, нечеткий шрифт и принт на упаковке, переклеенный батч-код подскажут, что перед вами не оригинал Escentric 02.

3. Флакон. Пульверизатор настоящих духов Escentric Molecules легко нажимается, равномерно распыляя содержимое пузырька. У подделки горлышко грубое, необработанное.

(подлинник справа)

4. Трубочка. У оригинала тонкая, полупрозрачная, гибкая на вид, достающая ровно до дна. Фейк снабжен толстой заметной трубкой. Как еще отличить подделку эксцентрика? Провести пальцем по стенкам флакона. У оригинала они гладкие, без явных швов, у контрафакта — неровные.

Второй эксцентрик и молекула: как не получится определить подлинность духов?

По запаху и цвету парфюма отличить творение Гезы Шоена от подпольной продукции не получится. Дело в том, что шлейф у молекул и эксцентриков индивидуальный благодаря синтетическим ингредиентам. Раскрывается он облаком или сидит близко к коже, зависит от разных факторов. Но это точно не пункт, как отличить подделку Escentric 02. То же касается и оттенка туалетной воды. Допустимы колебания от почти прозрачного до желтоватого содержимого флакона.

Как отличить подделку Molecule 02: советы, рекомендации, фото

«Молекула 02» стала одним из самых популярных ароматов бренда Escentric Molecules. К сожалению, известностью парфюма пользуются мошенники. Как отличить оригинал Molecule 02 от подделки и не дать себя обмануть?

(слева вода настоящая) 

Что нужно помнить о духах 02, эксцентриках и молекулах? 

1. они основаны на амброксане, аромат которого парфюмерные сайты и интернет-магазины описывают оригинал словами «кремовый, мускусный с нотами лайма, древесный» 

2. Escentric Molecules отличаются от традиционного раскрытия пирамиды композиции (верхние аккорды, средние, базовые) линейностью. Здесь не встретить соло цитрусовых или землистых нот, они звучат гармоничным многоголосием

(оригиналы)

3.  популярность линейки породила обилие контрафакта, дешевого и сопоставимого по цене с оригиналом «Молекула 02» 

4. их можно комбинировать с другими духами

Molecule 02: как отличить дешевую подделку

Культовый аромат породил множество случаев плагиата. Иногда отличить фейк молекул или эксцентриков легко, когда: 

неправильно написано название аромата на коробке 

нет основных сведений (объем парфюма, страна-производитель, ингредиенты духов)

упаковка сделана халтурно, криво, продавливается пальцами 

флакон Molecules 02 не распыляет духи, кажется неровным на просвет или режет острыми краями или швами 

Речь идет о том, как отличить низкокачественную подделку молекулы или эксцентрика. С дорогостоящей имитацией Escentric Molecules разобраться сложнее.

Качественные подделки «Молекулы 02»: как не дать себя обмануть

Есть хитрости, как отличить фейк даже в случае недешевых ароматов. 

1. мошенников выдают детали. Трубочка оригинала максимально незаметна даже в прозрачном стекле эксцентриков, она тонкая и достает ровно до дна.

Подделки отличают исполнение. Трубка часто грубая, белая, заворачивается по дну или не достает до него.

(справа истинный вариант молекулы) 

2. стекло флакона ровное, с одинаковыми тонкими стенками, без выпуклостей. Если на просвет стенки выглядят утолщенными, кривыми, со швами, то это фейк.

(с правой стороны подлинник) 

3. отличить контрафакт молекул и эксцентриков можно по распылителю.

У оригинала он аккуратный, с матовой отделкой, невысокий. Нужно помнить, что некоторые пункты не относятся к способам проверки аромата как оригинала или подделки! Например, оттенок воды бывает разный: он варьируется от прозрачного до насыщенного желтого.

(в обоих случаях продукция настоящая) 

Также на флаконе отсутствует крышка (и это нормально), может не быть треугольника на донышке (тоже вариант нормы).

Сайты производителей линеек: escentric.com, thebeautifulmindseries.com, kinskifragrance.com, steidl.de .

Молекула 02 новая Еscentric molecules | Festima.

Ru

Личные вещи

Таблица Список Лента

ТУАЛЕТНАЯ ВОДА ESCENTRIC MOLECULES ЕSCENTRIC 02 Куплена в дюти фри Запечатана, новая Композиция: сочетание амброксана и мускона, двух уникальных молекул – афродизиаков, в комбинации с ветивером, фиалковым корнем, экстрактом бузины и гидеоном.

Мы нашли это объявление 4 года назад
Нажмите Следить и система автоматически будет уведомлять Вас о новых предложениях со всех досок объявлений

Перейти к объявлению

Тип жалобы ДругоеНарушение авторских правЗапрещенная информацияОбъявление неактульноПорнографияСпам

Комментарий

Показать оригинал

Адрес (Кликните по адресу для показа карты)

Москва

Еще объявления

Продается оригинал молекулы 02 из личной коллекции,почти полный ,остаток на фото,возможен пересыл при 100% предоплате

3 месяца назад Источник

Оригинал! куплен в золотое яблоко( чек в личку)

6 месяцев назад Источник

Молекула 02 и эсцентрик 02 в наличии 100 мл.

6 месяцев назад Источник

В упаковке новая молекула 02, 04, 05 и молекула эксцентрик

6 месяцев назад Источник

Молекула эксцентрик 02 под заказ, предоплата 20%, доставка 3-5 дней. 100 % оригинал, любые проверки Отправка почтой и другими транспортными службами, при необходимости. P.s у молекулы произошёл ребрендинг и изменилась печать на коробках и флаконах, прикрепляю фото с официального сайта.

7 месяцев назад Источник

Строго оригинал !!! Один из самых вкусных и популярных ароматов данного бренда ! Новая упакованная молекула эсцентрик 02 100 мл — molecules escentric 02 ! Также есть возможность послушать аромат на оригинальность !) А также проверить подлинность изделия по куар коду,который указан на упаковке сзади !

7 месяцев назад Источник

Продаётся молекула 02, оригинал, 100 мл, тестер. Авито доставкой не отправляю, 100 оплата, могу отправить. Есть и другие молекулы.

7 месяцев назад Источник

Духи Escentric 02 — «Молекула» Новые. В упаковке. Объём 100 мл. Цена всего 8650. Доставка бесплатная. Находимся в Самаре. Отправка почтой. По 100% предоплате. Можем оформить Доставку Авито. Пишите. Эксцентрик 02 Арт: 107108

7 месяцев назад Источник

Продаю молекулу escentric 02, 85 мл из 100 примерно. Подарили не ту молекулу, эта уже была два раза. Оригинал!!! Обмен не интересует. Почтой отправляю по 100% предоплате.

8 месяцев назад Источник

Молекула 02

9 месяцев назад Источник

Продаётся молекула 02 эксцентрик. Свежий, современный аромат Escentric Molecules Escentric 02 легкий, простой и ненавязчивый. Случайно заказала 2 флакона. 100 % оригинал, любые проверки. Мой флакон открытый, можно послушать, второй полностью запечатан. Великобритания Без торга, продаю дешевле , чем заказывала

10 месяцев назад Источник

ОРИГИНАЛ!!!! Сомневающихся,просьба не беспокоить! Кого интересует молекула за 5000,это не ко мне!!! Есть пересыл Любые проверки Продажа только реальному покупателю.

10 месяцев назад Источник

Молекула 02. Подарили около месяца назад. Я ее не чувствую совсем, к сожалению , хотя окружающие делают комплименты. Оригинал 100% 90 из 100 мл

10 месяцев назад Источник

МОЛЕКУЛА Строго оригинал!!!! ESCENTRIC 02 100 мл, новый

10 месяцев назад Источник

Escentric Molecules Molecule 02 — духи Молекула 02 – монокомпозиция, которая помимо амброксана содержит еще и древесные, бархатные нотки, которые придают минеральную мягкость и деликатность. Роспив от 5 мл Доставка по России почта , сдэк По городу бесплатно

11 месяцев назад Источник

Escentric 02 100 мл. -11,800₽. Molecules 02 100мл. -11,700₽ Escentric 02 Escentric Molecules — это аромат для мужчин и женщин, он принадлежит к группе восточные цветочные. Escentric 02 выпущен в 2008 году. Парфюмер: Geza Schoen. Molecule 02 Escentric Molecules — это аромат для мужчин и женщин, он принадлежит к группе восточные. Molecule 02 выпущен в 2008 году. #распив#делюсь#отливанты#селективная парфюмерия#ниша#молекула#

год назад Источник

Оригинал, новый! 100 мл туалетная вода Под заказ с ожиданием неделя. В моем профиле только оригиналы, более 200т реальных отзывов клиентов! Пересылаю в любой город /СДЭК/Boxberry по предоплате

год назад Источник

100мл Оригинал По ассортименту уточняйте в личке

год назад Источник

По ассортименту уточняйте в личке Оригинал

год назад Источник

100 мл в упаковке. Вся парфюмерия только оригинал ✅ Бесплатная доставка по городу Симферополь. Бесплатная доставка в Джанкой.

год назад Источник

Внимание! Festima.Ru является поисковиком по объявлениям с популярных площадок. Мы не производим реализацию товара, не храним изображения и персональные данные. Все изображения принадлежат их авторам Отказ от ответственности

Войти

Все сервисы становятся доступными без ограничений

Сможете пользоваться сервисом Festima.Ru на разных устройствах.

Это удобно и бесплатно

Molecule 02 Туалетная вода Travel Sized от Escentric Molecules в The Conran Shop

Перейти в конец галереи изображений

Перейти к началу галереи изображений

Эта бутылка туалетной воды Molecule 02 Eau De Toilette от Escentric Molecules размером с дорожную содержит деликатно сбалансированный аромат, созданный на основе минерального амброксана, смешанный для создания соблазнительного аромата. Подробнее

Доставка в AfghanistanÅland IslandsAlbaniaAlgeriaAmerican SamoaAndorraAngolaAnguillaAntarcticaAntigua & BarbudaArgentinaArmeniaArubaAustraliaAustriaAzerbaijanBahamasBahrainBangladeshBarbadosBelgiumBelizeBeninBermudaBhutanBoliviaBosnia & HerzegovinaBotswanaBouvet IslandBrazilBritish Indian Ocean TerritoryBritish Virgin IslandsBruneiBulgariaBurkina FasoBurundiCambodiaCameroonCanadaCape VerdeCayman IslandsCentral African RepublicChadChileChinaChristmas IslandCocos (Keeling) IslandsColombiaComorosCongo — BrazzavilleCongo — KinshasaCook IslandsCosta RicaCôte d’IvoireCroatiaCubaCyprusCzechiaDenmarkDjiboutiDominicaDominican RepublicEcuadorEgyptEl SalvadorEquatorial GuineaEritreaEstoniaEthiopiaFalkland IslandsFaroe IslandsFijiFinlandFranceFrench GuianaFrench PolynesiaFrench Southern TerritoriesGabonGambiaGeorgiaGermanyGhanaGibraltarGreeceGreenlandGrenadaGuadeloupeGuamGuatemalaGuernseyGuineaGuinea-BissauGuyanaHaitiHeard & McDonald IslandsHondurasHong Kong SAR ChinaHungaryIcelandIndiaIndonesiaIranIraqIrela ndIsle of ManIsraelItalyJamaicaJerseyJordanKazakhstanKenyaKiribatiKuwaitKyrgyzstanLaosLatviaLebanonLesothoLiberiaLibyaLiechtensteinLithuaniaLuxembourgMacau SAR ChinaMacedoniaMadagascarMalawiMalaysiaMaldivesMaliMaltaMarshall IslandsMartiniqueMauritaniaMauritiusMayotteMexicoMicronesiaMoldovaMonacoMongoliaMontenegroMontserratMoroccoMozambiqueMyanmar (Burma)NamibiaNauruNepalNetherlandsNew CaledoniaNew ZealandNicaraguaNigerNigeriaNiueNorfolk IslandNorthern Mariana IslandsNorth KoreaNorwayOmanPakistanPalauPalestinian TerritoriesPanamaPapua New GuineaParaguayPeruPhilippinesPitcairn IslandsPolandPortugalQatarRéunionRomaniaRwandaSamoaSan MarinoSão Tomé & PríncipeSaudi ArabiaSenegalSerbiaSeychellesSierra LeoneSingaporeSlovakiaSloveniaSolomon IslandsSomaliaSouth AfricaSouth Georgia & South Sandwich IslandsSouth KoreaSpainSri LankaSt. Бартелеми Св. ЕленаСв. Китс и НевисСент. Люсия Св. МартинСт. Пьер и МикелонСв. Винсент и ГренадиныСуданСуринамШпицберген и Ян-МайенСвазилендШвецияШвейцарияТайваньТаджикистанТанзанияТаиландТимор-ЛештиТогоТокелауТонгаТринидад и ТобагоТунисТурцияТуркменистанОстрова Теркс и КайкосТувалуУгандаОбъединенные Арабские ЭмиратыСоединенное КоролевствоСоединенные ШтатыУругвайСША. Отдалённые островаСША Виргинские островаУзбекистанВануатуВатиканВенесуэлаВьетнамУоллис и ФутунаЗападная СахараЗамбияЗимбабве

С отслеживаемой доставкой всего за 3 фунта стерлингов, услугой доставки в белых перчатках от 89,50 фунтов стерлингов и международной доставкой в ​​более чем 70 стран от 30 фунтов стерлингов, мы здесь для всех; посетите наш Справочный центр, чтобы узнать ориентировочное время доставки.

Если вы заказываете мебель, мы свяжемся с вами и сообщим о месте доставки, чтобы собрать ваш заказ в удобное время, которое затем вы сможете изменить на удобное для вас время.

Если вам нужна помощь в демонтаже существующей мебели перед доставкой, мы рады предложить бесплатную услугу по сбору мебели в рамках British Heart Foundation.

Для всех других доставок мы предоставим вам номер для отслеживания, чтобы вы могли отслеживать путь вашего заказа от нас к вам.

Просмотр из-за пределов Великобритании? Используйте наш полезный инструмент оценки стоимости доставки, но имейте в виду, что из-за постоянно меняющихся цен мы не можем предложить точную оценку для более крупных поставок мебели. Позвоните нашим специалистам по продажам по телефону 020 7827 4496, чтобы узнать цену и оформить заказ.

Для клиентов из ЕС мы рекомендуем перейти на наш специальный французский веб-сайт, чтобы избежать местных налогов или импортных пошлин.

Пожалуйста, обратите внимание, что наши сроки поставки являются ориентировочными. Хотя мы стремимся к максимальной точности, доставка вашего заказа может быть изменена из-за обстоятельств, не зависящих от нас и наших поставщиков.

Для получения дополнительной информации посетите нашу специальную страницу «Доставка и возврат».

FluoSim: симулятор динамики отдельных молекул для флуоресцентной визуализации живых клеток и сверхвысокого разрешения мембранных белков

. 2020 17 ноября; 10 (1): 19954.

дои: 10.1038/s41598-020-75814-й.

Матье Лагардер ¹ , Ингрид Чамма ¹ , Эммануэль Буйоль ² , Маха Никольски ² , Оливье Тумин ³

Принадлежности

• ¹ CNRS, Междисциплинарный институт неврологии, IINS, UMR 5297, Univ. Бордо, 33000, Бордо, Франция.
• ² CNRS, IBGC, UMR 5095, Унив. Бордо, 33000, Бордо, Франция.
• ³ CNRS, Междисциплинарный институт неврологии, IINS, UMR 5297, Univ. Бордо, 33000, Бордо, Франция. olivier.thoumine@u-bordeaux.fr.

• PMID: 33203884
• PMCID: PMC7672080
• DOI: 10.1038/с41598-020-75814-у

Бесплатная статья ЧВК

Матье Лагардер и др. Научный представитель 2020 .

Бесплатная статья ЧВК

. 2020 17 ноября; 10 (1): 19954.

doi: 10.1038/s41598-020-75814-y.

Авторы

Матье Лагардер ¹ , Ингрид Чамма ¹ , Эммануэль Буйоль ² , Маха Никольски ² , Оливье Тумин ³

Принадлежности

• ¹ CNRS, Междисциплинарный институт неврологии, IINS, UMR 5297, Univ. Бордо, 33000, Бордо, Франция.
• ² CNRS, IBGC, UMR 5095, Унив. Бордо, 33000, Бордо, Франция.
• ³ CNRS, Междисциплинарный институт неврологии, IINS, UMR 5297, ун-т. Бордо, 33000, Бордо, Франция. olivier.thoumine@u-bordeaux.fr.

• PMID: 33203884
• PMCID: PMC7672080
• DOI: 10.1038/с41598-020-75814-у

Абстрактный

Методы флуоресцентной микроскопии живых клеток и сверхвысокого разрешения значительно продвинули наше понимание динамики и мезомасштабной организации макромолекулярных комплексов, которые управляют клеточными функциями. Тем не менее, различные методы визуализации могут предоставить совершенно несопоставимую информацию о движении и организации белка из-за их соответствующих экспериментальных диапазонов и ограничений. Чтобы решить эти проблемы, мы представляем здесь надежную компьютерную программу под названием FluoSim, которая представляет собой интерактивный симулятор динамики мембранных белков для методов визуализации живых клеток, включая SPT, FRAP, PAF и FCS, а также методы визуализации сверхвысокого разрешения, такие как PALM. , dSTORM и uPAINT. FluoSim объединяет коэффициенты диффузии, скорости связывания и фотофизику флуорофоров для расчета в режиме реального времени локализации и интенсивности тысяч независимых молекул в двумерной клеточной геометрии, обеспечивая смоделированные данные, непосредственно сопоставимые с реальными экспериментами. FluoSim был тщательно проверен на соответствие экспериментальным данным, полученным для канонического адгезионного комплекса нейрексин-нейролигин при межклеточных контактах. Это унифицированное программное обеспечение позволяет моделировать и прогнозировать динамику и локализацию мембранных белков на уровне ансамбля и отдельной молекулы, чтобы согласовать парадигмы визуализации и количественно охарактеризовать поведение белка в сложных клеточных средах.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Цифры

Рисунок 1

Схемы тренажера и…

Рисунок 1

Схема тренажера и экспериментальной системы. ( a ) Общий принцип…

Рисунок 1

Схема тренажера и экспериментальной системы. ( a ) Общий принцип FluoSim. ( b ) Контакт между двумя клетками COS, одна из которых экспрессирует GFP-Nrx1β (зеленая), а другая экспрессирует Nlg1-mCherry (пурпурный), что приводит к накоплению молекул за счет адгезионных взаимодействий (желтая зона). ( c ) Диаграмма, показывающая увеличенный участок межклеточного интерфейса на покровном стекле; желтый луч представляет собой косое лазерное освещение. ( d ) Мультфильм диффузионного захвата Nrx1β с помощью Nlg1 в межклеточном контакте.

Рисунок 2

Подгонка экспериментов SPT. ( а…

Рисунок 2

Подгонка экспериментов SPT. ( a ) Необработанное изображение клетки COS-7, экспрессирующей…

фигура 2

Эксперименты по подгонке СПД. ( a ) Необработанное изображение клетки COS-7, экспрессирующей GFP-Nrx1β, редко помеченной нанотелом GFP, конъюгированным с Atto647N (белый сигнал). ( b ) Изображение смоделированных молекул в той же геометрии. Прямоугольниками обозначена поверхность раздела между клеточной областью со свободно диффундирующими молекулами GFP-Nrx1β (синий контур) и областью контакта с клеткой, экспрессирующей Nlg1-mcherry (желтый контур). Справа увеличенный масштаб этой области интереса показывает траектории одиночных молекул как для экспериментов, так и для моделирования. Коэффициент диффузии, выраженный в логарифмической шкале, имеет цветовую маркировку. ( c ) Распределения коэффициентов диффузии GFP-Nrx1β для экспериментов (кружки, среднее ± среднеквадратичное отклонение для 3 клеток, 4145 траекторий в контакте и 4867 вне контактов) и моделирования (штриховые линии, 5 повторений, 8757 траекторий в контакте и 2645 траекторий вне контактов ) на полулогарифмическом графике. Коэффициент корреляции Спирмена при сравнении эксперимента и моделирования составил r = 0,85 ( P  < 0,001, n = 36 интервалов) для контактных областей и r = 0,81 ( P  < 0,001, n = ) для 36 интервалов. ( d ) Репрезентативные примеры траекторий отдельных молекул на границе раздела: (слева) молекула выходит из контакта и свободно диффундирует или входит в контакт и попадает в ловушку; (справа) молекула застревает в контакте с низкой диффузией или отскакивает от контакта, не вступая в него.

Рисунок 3

Подгонка экспериментов SRI. ( а…

Рисунок 3

Подгонка экспериментов SRI. ( a ) Репрезентативное одиночное изображение ШТОРМА…

Рисунок 3

Подгонка экспериментов SRI. ( a ) Репрезентативное однокадровое изображение последовательности STORM, выполненной на GFP-Nrx1β, меченном нанотелом GFP, конъюгированным с Alexa647, и соответствующее изображение со сверхвысоким разрешением, полученное из 3,57 × 10 ⁶ локализаций отдельных молекул (размер пикселя 32 нм, всего время сбора данных 1600 с). Количество молекул, обнаруженных на пиксель, кодируется цветом. ( b ) Смоделированное изображение, показывающее испускание флуоресценции одиночной молекулы в той же геометрии клетки, и соответствующая карта сверхвысокого разрешения с точностью локализации 58 нм (FWHM). Общее количество обнаружений составляет 3,61 × 10 ⁶ . ( c ) Испускание флуоресценции с течением времени от изолированного нанотела GFP, конъюгированного с Alexa647, связанного с покровным стеклом в последовательности STORM, и смоделированное испускание флуоресценции неподвижной молекулы, полученное с частотой включения и выключения 0,006 с ^-1 и 9,3 с ^-1 соответственно.

Рисунок 4

Установка экспериментов с FRAP. ( а…

Рисунок 4

Установка экспериментов с FRAP. ( a ) Репрезентативные изображения клеток COS-7, экспрессирующих GFP-Nrx1β…

Рисунок 4

Подгонка экспериментов с FRAP. ( a ) Репрезентативные изображения клеток COS-7, экспрессирующих GFP-Nrx1β, либо не образующих контакта (слева), либо образующих контакт с другой клеткой, экспрессирующей Nlg1-mCherry (справа). ( b ) Соответствующие последовательности FRAP на увеличенных квадратных областях (диаметр обесцвеченного круга   =   2,8 мкм). Интенсивность имеет цветовую маркировку. ( c , d ) Смоделированные изображения клеток той же геометрии, заполненных 150 000 флуоресцентными молекулами, и соответствующие последовательности FRAP. ( e ) Нормализованные кривые FRAP, полученные экспериментальным путем (закрашенные кружки) вне (среднее значение ± sem для 6 клеток, 44 обесцвеченных участка) или внутри контактных областей (среднее значение ± sem для 18 клеток, 144 обесцвеченных участка) и соответствующего моделирования (сплошные кривые, в среднем по 30 повторений в каждом, среднее значение sem < 1%, не показано). Коэффициент корреляции Спирмена при сравнении эксперимента и моделирования составил r = 1,0 ( P  < 0,001, n = 21 момент времени) для областей контакта и r = 0,98 ( P  < 0,001, n = 43 момента времени) для внешних регионов.

Рисунок 5

Подгонка экспериментов PAF. ( а…

Рисунок 5

Подгонка экспериментов PAF. ( a , c ) Репрезентативные изображения клеток COS-7…

Рисунок 5

Подгонка экспериментов PAF. ( а , с ) Репрезентативные изображения клеток COS-7, совместно экспрессирующих BFP (синий) плюс PAGFP-Nrx1β и либо не образующих контакта, либо образующих контакт с другой клеткой, экспрессирующей Nlg1-mCherry (красный). Геометрия ячейки (синий контур) вводится в симулятор вместе с областью контакта (желтая линия). ( b , d ) Соответствующие последовательности PAF на увеличенных участках (штриховые квадраты), где фотоактивированное пятно указано белым цветом (круг диаметром   =   2,8 мкм). Экспериментальные и смоделированные изображения показаны друг над другом для указанных моментов времени. Интенсивность флуоресценции кодируется цветом. ( e ) График, показывающий интенсивность флуоресценции, нормализованную между 0 и 1, для экспериментов с PAF, проведенных снаружи (синие кружки) или внутри (оранжевые кружки) контактных областей (среднее значение ± sem для 5 клеток/1 область PAF на клетку и 3 клеток/2 областей PAF на клетку соответственно). Соответствующие симуляции (сплошные кривые) представляют среднее значение 20 повторений (среднее значение sem < 2%, не показано). Коэффициенты корреляции Спирмена при сравнении эксперимента и моделирования составили r = 0,998 для областей контакта и r = 0,9.95 для внешних регионов ( P  < 0,0001, n = 32 момента времени в обоих условиях).

Рисунок 6

Подгонка экспериментов FCS. ( а…

Рисунок 6

Подгонка экспериментов FCS. ( a ) Изображения нанотела GFP, конъюгированного с Atto647N, связанного с…

Рисунок 6

Подгонка экспериментов FCS. ( a ) Изображения нанотела GFP, конъюгированного с Atto647N, связанного с клетками COS, экспрессирующими GFP-Nrx1β, не образуя контакта (слева) или образуя контакт с клеткой, экспрессирующей Nlg1-mCherry (справа). Сфокусированный лазерный луч с длиной волны 642 нм и шириной на полувысоте 0,6 мкм был припаркован в контактных или бесконтактных областях, и были получены квадратные изображения освещенной области (1 мкм × 1 мкм) с частотой 200 или 500 Гц соответственно. ( b ) Колебания интенсивности с течением времени в двух областях (цвет), выше шума камеры (серый). На вставках представлены изображения, полученные в указанные моменты времени (звездочки). Интенсивность имеет цветовую маркировку. ( c , d ) Смоделированные изображения с использованием той же геометрии ячеек, содержащих 2500 и 200 молекул соответственно, и соответствующих колебаний интенсивности. ( e ) Нормализованные автокорреляционные функции для экспериментов FCS (штриховые кривые), выполненных снаружи (2 клетки/10 записей) и внутри областей контакта (1 клетка/3 записи), и соответствующих симуляций (сплошные кривые, в среднем по 10 повторов каждая).

См. это изображение и информацию об авторских правах в PMC

Похожие статьи

• Протокол восстановления флуоресценции одиночных молекул после микроскопии фотообесцвечивания для анализа динамики и пространственного расположения ядерных трансмембранных белков в живых клетках.

  Тинги М., Ли Ю, Ян В. Тинги М. и др. ЗВЕЗДА протокол. 2021 30 апреля; 2(2):100490. doi: 10.1016/j.xpro.2021.100490. электронная коллекция 2021 18 июня. ЗВЕЗДА протокол. 2021. PMID: 34007970 Бесплатная статья ЧВК.

• Одночастичная фотоактивированная микроскопия локализации мембранных белков в тканях живых растений.

  Бейль В., Фиш Дж. Б., Берни С., Платр М. П., Ноллманн М., Мартиньер А., Жайе Ю. Бейл В. и др. Нат Проток. 2021 март; 16(3):16:00-16:28. doi: 10.1038/s41596-020-00471-4. Epub 2021 24 февраля. Нат Проток. 2021. PMID: 33627844

• Количественная микроскопия локализации одной молекулы (qSMLM) мембранных белков на основе кинетического анализа циклов мигания флуорофора.

  Фрике Ф., Бодуэн Дж., Малкуш С., Эйлс Р., Хайлеманн М. Фрике Ф. и др. Методы Мол Биол. 2017;1663:115-126. doi: 10.1007/978-1-4939-7265-4_10. Методы Мол Биол. 2017. PMID: 28924663

• Изображения со сверхвысоким разрешением, основанные на локализации, соответствуют скринингу с высоким содержанием.

  Бегин А., Кечкар А., Батлер С., Леве Ф., Кабиллик М., Россье О., Джанноне Г., Галланд Р., Шоке Д., Сибарита Д.Б. Бегин А и др. Нат Методы. 2017 Дек;14(12):1184-1190. doi: 10.1038/nmeth.4486. Epub 2017 30 октября. Нат Методы. 2017. PMID: 29083400

• Флуоресцентная микроскопия для визуализации динамики одиночных молекул белка.

  Йокота Х. Йокота Х. Биохим Биофиз Acta Gen Subj. 2020 Февраль; 1864(2):129362. doi: 10.1016/j.bbagen.2019.05.005. Эпаб 2019 10 мая. Биохим Биофиз Acta Gen Subj. 2020. PMID: 31078674 Обзор.

Посмотреть все похожие статьи

Рекомендации

1. 1. Шоке Д., Триллер А. Динамический синапс. Нейрон. 2013;80:691–703. doi: 10.1016/j.neuron.2013.10.013. — DOI — пабмед
2. 1. Дастин М.Л., Чоудхури К. Передача сигналов и поляризованная коммуникация через Т-клеточный иммунологический синапс. Анну. Преподобный Cell Dev. биол. 2016; 32:303–325. doi: 10.1146/annurev-cellbio-100814-125330. — DOI — пабмед
3. 1. Лю З. , Лавис Л.Д., Бетциг Э. Визуализация динамики и структуры живых клеток на уровне отдельных молекул. Мол. Клетка. 2015; 58: 644–659. doi: 10.1016/j.molcel.2015.02.033. — DOI — пабмед
4. 1. Липпинкотт-Шварц Дж., Снапп Э.Л., Фэйр Р.Д. Разработка и усовершенствование FRAP как ключевого инструмента для исследования динамики белков. Биофиз. Дж. 2018; 115:1146–1155. doi: 10.1016/j.bpj.2018.08.007. — DOI — ЧВК — пабмед
5. 1. Мэнли С.